La chromatographie sur colonne est une technique utilisée pour séparer et purifier les composants individuels d'un mélange. L'appareil requis pour la chromatographie sur colonne comprend généralement :
1. Colonne de chromatographie
Un tube en verre ou en plastique qui sert de composant principal où se produit la séparation.
La colonne est remplie d'une phase stationnaire (par exemple gel de silice, alumine) qui adsorbe les composants du mélange.
2. Phase stationnaire
Un matériau solide tel que du gel de silice ou de l'alumine est utilisé pour remplir la colonne.
Le choix de la phase stationnaire dépend de la polarité des substances à séparer.
3. Phase mobile (éluant)
Liquide ou gaz qui se déplace à travers la phase stationnaire et entraîne le mélange d'échantillons.
Le choix du solvant dépend des propriétés du mélange à séparer et de la phase stationnaire.
4. Réservoir ou entonnoir
Positionné en haut de la colonne pour contenir et délivrer la phase mobile dans la colonne de manière contrôlée.
5. Exemple de système de demande
Une pipette ou une seringue est utilisée pour appliquer le mélange sur le dessus de la phase stationnaire emballée.
6. Navire de collecte
Des récipients ou des tubes à essai sont utilisés pour collecter les composants séparés (fractions) à la sortie de la colonne.
7. Système de distribution d'éluant
Gravité : s'appuie sur la gravité pour tirer la phase mobile à travers la colonne.
Pompe : Pour des débits plus rapides ou plus contrôlés, en particulier dans la chromatographie sur colonne haute pression.
8. Robinet ou valve
Un dispositif en pied de colonne pour contrôler le débit de la phase mobile.
9. Support et pinces
Utilisé pour maintenir la colonne verticale et stable pendant l'expérience.
Équipement optionnel :
Lampe UV ou détecteur: Pour visualiser les composants séparés, surtout s'ils sont colorés ou actifs aux UV.
Manteau chauffant ou bain-marie: Pour le contrôle de la température si nécessaire.
Plaques de chromatographie sur couche mince (CMC): Parfois utilisé pour suivre la progression de la séparation.
La combinaison de ces composants permet une séparation et une analyse efficaces de mélanges complexes dans la recherche chimique et biologique.