La chromatographie sur colonne est une technique largement utilisée en chimie et biochimie pour séparer et purifier des composés. Le matériel nécessaire comprend :
Équipement de base :
Colonne:
Généralement en verre ou en plastique.
Doit être transparent pour observer la progression de la séparation.
Phase stationnaire:
Un adsorbant solide, tel que du gel de silice, de l'alumine ou une résine.
Phase mobile:
Un solvant liquide ou un mélange de solvants pour transporter l'échantillon à travers la colonne.
Support et pince:
Maintenir la colonne à la verticale pendant l’expérience.
Échantillon d'applicateur:
Une pipette, une seringue ou un entonnoir pour appliquer l'échantillon sur la colonne.
Navires de collecte:
Tubes à essai ou béchers pour recueillir les fractions au fur et à mesure qu'elles s'éluent de la colonne.
Pompe d'élution ou gravité:
La gravité peut être utilisée pour permettre l’écoulement du solvant dans des configurations plus simples.
Un pousse-seringue ou péristaltique pour un débit contrôlé et constant.
Robinet ou valve:
Pour réguler le débit de solvant à travers la colonne.
Papier filtre ou bouchon en coton:
Pour éviter que la phase stationnaire ne s'échappe de la colonne avec l'éluant.
Plaques CCM (chromatographie sur couche mince):
Pour suivre la progression de la séparation.
Équipement optionnel :
Collecteur de fractions:
Un système automatisé pour collecter les fractions dans des conteneurs séparés.
Détecteur:
Un détecteur UV ou détecteur d'indice de réfraction pour un suivi en temps réel de l'éluant.
Pompe à vide:
Pour une élution plus rapide (utilisé en chromatographie sur colonne flash).
Source de chaleur:
Pour les expériences nécessitant un contrôle de la température.
pH-mètre:
Pour garantir que la phase mobile maintient le pH correct.
En sélectionnant le bon équipement et en ajustant des paramètres tels que le choix des phases stationnaires et mobiles, la chromatographie sur colonne peut être optimisée pour des tâches de séparation spécifiques.